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鹽酸苯肼誘發的溶血性貧血大鼠模型
2020-12-23

[建模方法]

向體重約180g的雄性Sprague Dawley大鼠腹膜內注射鹽酸苯肼,劑量為40 mg / kg,持續5天。注射苯肼鹽酸鹽五天后,常規麻醉大鼠。從大鼠的股靜脈中抽血以確定血漿中無血紅蛋白,觸珠蛋白,變性的球蛋白體,外周血紅細胞計數,血紅蛋白,白細胞,網織紅細胞和血小板。從大鼠股骨上取骨髓涂片,觀察骨髓的增殖,計算粒細胞紅的比例,并測量肝,脾的重量。用10%甲醛溶液固定骨髓,肝,脾。然后進行常規的組織切片。進行HE染色和光學顯微鏡觀察。

[型號特點]

注射5天后,模型大鼠反應緩慢,活動減少,尾巴,嘴唇和四肢皮膚蒼白,尿液呈深黃色;紅細胞計數和血紅蛋白濃度顯著下降,網織紅細胞顯著增加;變性的球蛋白體和游離Hb也增加,肝臟和脾臟的體積和重量增加,這與正常對照組的大鼠明顯不同。在顯微鏡下對模型動物的組織病理學觀察表明,在骨髓血管中可見少量滲血,巨核細胞和紅系增殖活躍。肝細胞顯示輕度和中度顆粒變性,肝實質充血;脾臟的紅髓擴大并分散,紅細胞致密,脾竇充滿紅細胞,擠壓白髓,可見舊出血。腹膜內注射鹽酸苯肼5天后,動物表現出明顯的貧血跡象,血液和骨髓的溶血性貧血,以及某些組織和器官的病理損害。模型制備方法簡單,可靠,死亡率低,實用性強。

比較醫學

溶血性貧血是臨床上造血系統的常見疾病,目前尚無更好的治療方法。建立理想的溶血性貧血動物模型,對于研究人類溶血性貧血的發病機理,機制以及觀察藥物療效具有重要意義。在該模型中,鹽酸苯肼被用于誘導大鼠溶血性貧血。其主要機理是苯肼注入血液后可與氧合血紅蛋白迅速反應生成高鐵血紅蛋白(MHB),氮和苯。 MHB是Hb分子變性的重要步驟,因為體內MHB的血紅素比氧化Hb更容易丟失,并且沒有血紅素的球蛋白容易沉淀。在正常情況下,盡管紅細胞會與過氧陰離子(O2--),過氧化氫(H2O2)和脂質過氧化物等氧化劑持續接觸,但仍可以保持其完整性。紅細胞中有三種酶:過氧化氫酶,還原型谷胱甘肽過氧化物酶(GSHPx)和超氧化物歧化酶(SOD)。這些酶可以保護紅細胞免受氧化損傷。但是,當O2-和H2O2的產生超過SOD和過氧化氫酶保護紅細胞免受氧化損傷的能力時,Hb的巰基,酶蛋白和膜蛋白可以被氧化,Hb可以被氧化形成MHB和亨氏的身體。 Heinz體在紅細胞膜上的沉積會降低其流動性并增加其滲透性,從而導致氧化性溶血。同時,苯肼可以裂解某些重要的膜功能區域,并在體內或體外抑制CA依賴性ATPase在紅細胞膜上,導致紅細胞中Ca濃度迅速增加。因此,推測紅細胞中Ca環境的紊亂是氧化劑引起的溶血的重要因素,并且紅細胞膜的脂質過氧化也可以加速溶血的產生,因為多不飽和脂肪酸和紅細胞中的二烯鏈直接降低了膜的流動性和膜氨基丙烯鏈的形成,從而破壞了紅細胞膜的正常功能。

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